Endomicroscopie confocale

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L'Endomicroscopie
(Confocal Endomicroscopy)

vraisemblance, les mêmes critères de fiabilité, de rapidité et de simplicité.

par PENTAX

Introduction
Jusqu'à la mise au point puis au lancement de l'Endomicroscopie Confocale par PENTAX, le diagnostic endoscopique conventionnel des lésions intestinales reposait essentiellement sur l'appréciation macroscopique du tractus digestif, sur l'inspection directe ou « écho-endographique » de la paroi intestinale, et sur la réalisation de biopsies, soit sous contrôle de la vue, soit guidées par échoendoscopie et/ou par l'utilisation de colorations vitales plus ou moins spécifiques de certains tissus. Cette procédure très largement répandue de nos jours, et dont l'avenir d'ailleurs n'est pas à remettre (au moins immédiatement) en question, montre néanmoins les limites auxquelles elle est logiquement soumise, et qui tiennent autant au pouvoir de résolution propre à l'acuité visuelle de l'opérateur, qu'à la fiabilité des colorations vitales utilisées classiquement. Véritable technologie de pointe, nous montrerons dans cet article comment l'Endomicroscopie Confocale à balayage laser permet une visualisation « micro-anatomique » de la muqueuse et du chorion, et pourquoi ce mode de dépistage de lésions digestives à un stade « inframacroscopique », constitue non seulement une avancée biomédicale majeure pour le diagnostic de certitude histologique et la surveillance des patients, mais aussi, et selon certains critères de validité, pour le traitement des lésions néoplasiques superficielles de bas grade.

« De l'endoscopie cellulaire à l'endoscopie moléculaire »
Dr. Thierry ROUQUET
PENTAX France Life Care,
Division Médicale (1)

Résumé
Le bilan, la prise en charge et le pronostic des lésions notamment malignes du tube digestif, sont améliorés de manière significative lorsque le diagnostic est porté à un stade précoce de leur développement. L'indiscutable intérêt d'une telle détection est d'autant plus important qu'il s'agit de lésions dont le caractère « précancéreux » est désormais bien établi, mais également lorsqu'il s'agit de lésions dites « de bas grade » ou « superficielles » du tube digestif. Depuis son apparition et sa réalisation en pratique quotidienne, l'endoscopie digestive a fait l'objet de nombreuses améliorations technologiques, dont les principales ont concerné plus particulièrement la performance du matériel endoscopique, la maniabilité des instruments, la faisabilité des procédures, tout autant que la définition et le traitement informatisé de l'image. La mise au point, le développement et la commercialisation par PENTAX de l'Endomicroscopie Confocale (à balayage laser), permet désormais l'observation de la muqueuse digestive avec une résolution de l'ordre du micron (grossissement x 1000), et un examen histologique « in vivo ­ in situ » des lésions, c'est-à-dire en temps réel, avec une fiabilité comparable à celle d'une biopsie conventionnelle prélevée, acheminée, puis examinée en temps différé au laboratoire. Parallèlement, l'amélioration et le développement de nouveaux « colorants vitaux » d'une part, et les recherches menées d'autre part sur le « marquage colorimétrique nucléaire », le « marquage cellulaire spécifique », et l' « immuno-cyto-fluorescence », ont non seulement tracé la route de l' « endoscopie histocytologique », mais ont également ouvert celle sur l' « endoscopie moléculaire », avec, selon toute
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Matériel et modalités opératoires
L'Endomicroscope Confocal PENTAX
L'Endomicroscope Confocal PENTAX consiste en un vidéo-coloscope, à l'extrémité distale duquel se trouve un microscope miniaturisé fonctionnant sous balayage laser. Son alimentation lumineuse nécessite donc une double source externe et proximale : standard et laser.

Dr Thierry ROUQUET Responsable Marketing - Communication & Relations Scientifiques. PENTAX France, Division Médicale.

Photo « vue d'ensemble »

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« Extrémité distale »

Confocale deviendrait la référence diagnostique, des biopsies seraient bien entendu réalisables, selon les mêmes conditions qu'à l'occasion d'une endoscopie « conventionnelle », mais avec une précision grandement améliorée par le grossissement optique de l'endomicroscope.

Photo « Colonne Endomicroscope »

Le tableau suivant résume les principales caractéristiques techniques de l'Endomicroscope PENTAX.
Angle de vue de l'image endoscopique Champ de vision de l'image endomicroscopique (µm) Focus image Conventionnelle (mm) Focus image endomicroscopique (µm) Diamètre du Tube (mm) Diamètre canal opérateur (mm) 140° 500 x 500 3 ­ 100 0 - 250 12,8 2,8

Photo : Muqueuse digestive glandulaire

Photo : Résolution axiale et tranches optiques

Applications et discussion
« Endo-Histologie Digestive » : Au-delà du visible !
L'Endomicroscopie, dont le développement et la commercialisation reviennent exclusivement à PENTAX, représente une avancée technologique majeure dans l'éventail des moyens diagnostiques des lésions superficielles et de bas-grade du tube digestif. En effet, non seulement cette procédure endoscopique avant-gardiste permet un dépistage précoce des lésions, dysplasiques, dégénératives et inflammatoires, mais de surcroît, elle autorise à parler de véritable « histologie in vivo », tant la résolution de l'ordre du µm, et la haute définition de l'image recueillie par balayage laser en temps réel, équivalent celles des biopsies recueillies, transportées et examinées au laboratoire en temps différé.

Les performances de l'Endomicroscope Confocal PENTAX sont telles, qu'elles permettent une observation micro-anatomique de la muqueuse digestive, à la fois en superficie et sur une profondeur de 250 µm, sous un champ de vision correspondant à 500 µm x 500 µm, et avec une résolution de l'ordre de 1 µm. L'analyse endomicroscopique de la muqueuse digestive et du chorion, nécessite en premier lieu leur imprégnation préalable par un agent colorant fluoré : la fluorescéine par voie IV (tropisme sur le chorion, les espaces interstitiels et la microvascularisation) ; l'acriflavine (tropisme cellulaire, nucléaire et cytoplasmique) ; mais également et dans certaines circonstances, le lugol, le bleu de méthylène, l'acide acétique ou le rouge carmin. En fonction de leur fixation plus ou moins spécifique, ces « colorations vitales » ont pour vocation de révéler certaines anomalies nucléo-cytoplasmiques, cellulaires, vasculaires ou interstitielles, évocatrices de lésions dysplasiques, dégénératives et/ou inflammatoires, à un stade précoce de leur développement. Enfin, en cas de doute persistant malgré l'analyse minutieuse d'une zone muqueuse ou sous-muqueuse suspecte du tube digestif, et dans l'hypothèse où l'Endomicroscopie

Conditions de réalisation
Les qualités techniques de l'Endomicroscope sont jugées excellentes par la majorité des opérateurs qui, de surcroît, estiment que les conditions de réalisation de la procédure, restent tout à fait « classiques », c'est-à-dire identiques à celle de l'Endoscopie conventionnelle. En effet, il n'y a aucune précaution spécifiquement inhérente à l'Endomicroscopie, et qui pourrait y faire sursoir ou lui préférer l'endoscopie habituelle. En outre, les précautions propres à l'utilisation des colorations vitales sont elles aussi « non spécifiques », et

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Caractéristiques techniques Type Capteur CCD Appareil numérique compact avec zoom et flash incorporés 6,36 mégapixels ­ totaux 6,0 mégapixels ­ effectifs CCD de 1/2,5" à transfert interligne avec filtre de couleurs primaires smc 5,8 ­ 17,4 mm f/2,6 ­ 4,8 (35 ­ 106 mm au format 35 mm) Zoom numérique 2,6x 3 x 12 bits Photo : JPEG (Exif 2.2), DCF, DPOF, PIM III 2816 x 2112 1600 x 1200 640 x 480 82 248 997 165 414 1558 248 622 2078 Les résolutions de 2560 x 1920, 2304 x 1728, 2048 x 1536...

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